鹿人工授精技术要点

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鹿人工授精技术要点

作者：张燕 柳潘平 赵志财

来源：《农家科技下旬刊》2014年第10期

随着科学技术的不断发展进步，利用鹿的繁殖生理原理，在鹿的繁殖过程中采用同期发情、冷冻精液、人工授精及早期妊娠诊断等先进新技术，可以加快鹿的繁殖和育种工作，大大提高了养鹿业的生产水平和生产能力，加速茸鹿品质改良，提高鹿产品数量和质量。推动养鹿业持续健康稳定发展。 一、人工采精 1.假阴道采精

用木或铁材料制成形似母鹿的外形，包上鹿皮，在后臀适当部位留出安装假阴道及保温装置的孔子及空间。以硬质橡胶管作外壳，软质像胶作内胎，中间一注水打气阀孔做成假阴道。将假阴道安装在采精场内假台鹿的适宜部位，立即拨赶供试公鹿入采精诱其爬跨假台鹿，使公鹿阴茎插入假阴道内射精。 2.电刺激采精

采精公鹿用专用麻醉药麻醉使其侧卧保定，保定好公鹿的四肢、掏出直肠内的宿粪；用剪毛剪剪短尿道口附近的长毛、用刺激性较小的消毒剂清洁尿道口部位，导出阴茎并用绷带将龟下端阴茎缠绕数圈，使龟头露出，用一条干净的的毛巾覆盖在尿道口前部，然后将直肠探子插入直肠20-25cm并使电极部位与直肠腹面接触，打开电压开关，一档一档升高电压，间断性刺激公鹿射精中枢，直至射精。将精液收集到温热的集精杯中，避免冷打击此外还有按摩法、附睾取精和阴道取精法，目前应用较少，这里不作介绍。 二、精液检查及稀释

正常精液为乳白色或乳黄色，正常情况下精液无味或微腥。采到的精液立即送到实验室，先加少量稀释液，取一滴初步稀释的精液置400-600倍显微镜下检查精子密度和活力，确定是否继续稀释或确定稀释倍数。原则是预计解冻后每管冻精含有有效精子数不少于1500万。稀释时，将与精液等温（38℃左右）的稀释液用干净消毒后的滴管沿试管壁缓缓加入精液中，并慢慢转动试管使其混合均匀（不能摇动或剧烈震荡）。边稀释边镜检，直到稀释到恰当的倍数。

细管冻精可用38±2℃温水，直接浸入水中8秒钟左右取出即可。解冻后的细管冻，精有效使用时间（1限）1小时。解冻后检查精子活力，达0.3以上，有效精子数1000万/支以上，解冻后的精子畸形率（上限）20%。顶体完整率（下限）40%每ml细菌菌落数（上限）1000


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个，解冻后精子存活时间在5-8℃，，贮存时（下限）为12小时。在37℃贮存时（下限）为4小时。

三、精液保存 1.常温保存

根据精液的活力和密度用常温稀释液将精液稀释，在无剧烈温度变化及相对稳定的情况下精液可在常温下保存48-72小时。 2.冷冻保存

（1）平衡。将稀释好的精液用硫酸纸封好管口，再用棉片包好试管将装有精液的试管装入与清液等温的水杯中，放入4-5℃的冰箱中缓缓降温平衡3-5小时。

（2）分装。将平衡好的精液分装装管，有条件的可使用分装机分装，如没有分装机可进行手工分装，用一次性注射器将精液抽到细管中（注意在抽精液的过程中不要使细管中混有空气），另一端要留有1cm的空隙，用封口粉封口。

（3）冷冻。分装后的细管精液可用程序降温仪进行冷冻，如果无条件可进行手工冷冻，将细管精液放在冷冻架上，逐步缓缓放入液氮中，在冷冻过程中注意液氮液面的高度，细管精液距液氮面过低或过高，都会造成精子大批死亡，冷冻完毕的精液放在液氮罐中保存，注意定期添加液氮。

（4）解冻。细管冻精从液氮中取出后立即放入盛有40℃温水的杯中，经过3-5秒钟立即取出，放在手上揉搓几下，待全部取化时，即可镜检后装入输精枪内等待输精。 四、母鹿同期发情

同期发情能在短时间内使畜群集中发情，使母鹿配种妊娠、分娩及犊鹿的培育在时间上相对集中，从而有效地进行饲养管理，进行人工授精，节约劳动力和费用，同时又因配种同期化，对以后的分娩产羔，鹿群周转以及商品鹿的成批生产等一系列的组织管理带来方便，适应现代集约化生产或工厂化生产的要求。同期发情有两种方法：一种方法是促进黄体退化（前列腺素处理法），从而降低孕缴素水平；另一种方法是抑制发情（孕激素处理法）增加孕激素水平。

目前鹿同期发情常用的是孕激素处理法中的阴道栓塞法，阴道栓为“T”形，中间有硬塑料骨架，外包被着发泡的硅像胶，硅像胶的微孔中有孕激素，用放置器成品阴道栓送到母鹿的阴道里，11-13天左右取出阴道栓，同时每头母鹿肌注250国际单位孕马血清，母鹿将在58-60小时后达到发情高峰，使用这种方法的同期发情率可达80%左右，也可取出阴道时用公鹿进行试情，母鹿在第一次接受爬跨后12小时左右输精，准胎率会有所提高，但操作繁琐。


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五、人工输精

目前常用的茸鹿人工输精方法有三种，即开膣器输精法、直肠把握输精方法和腹腔镜输精法，可根据不同鹿种而采取不同方法，目前马鹿母鹿应用最广泛的是直肠把握法，花母鹿常用开膣器或腹腔镜输精法。 1.直肠把握输精法

适用于体型较大的马鹿母鹿或操作人员手小能伸入骨盆腔口的梅花鹿母鹿，将待输精的母鹿麻醉侧卧保定，马母鹿可用保定器站立保定。操作者剪平指甲，戴好长臂医用手套，并在手套表面涂上温热的专用润滑剂，插入直肠，排出宿粪，隔直肠壁把握子宫颈，使阴道和子宫颈大致成一条直线，另一手持装有细管精液输精枪，经由阴道前庭入口缓缓前伸插入子宫颈阴道开口，通过子宫管内3-5个皱褶，将精液输入到子宫颈深部或子宫体内，然后撤出输精枪，同时给母鹿肌注促黄体素释放激素A325ug。 2.开膣器输精法

此法适用于不能进行直肠把握输精操作的母鹿，其主要过程与直肠握输精法相同，不同的是操作者使用专用的开膣器缓慢插入母鹿阴道，使开膣器前端紧靠子宫颈口处，借助灯泡光亮，找到子宫颈口，然后将输精枪插入子宫颈阴道开口完成输精，同时给母鹿肌注促黄体素释放激素A325ug。

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