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甲醛杀菌灭活病毒机理及沉淀后的解聚法浅议
一、甲醛杀菌和灭活病毒机理
甲醛(HCHO)属中到高效化学消毒剂, 低浓度为抑菌剂, 高浓度可作为灭菌剂。杀菌谱广,对细菌繁殖体、芽胞以及病毒等均有杀灭作用, 但作用时间较其它高效消毒剂为长, 一般认为, 革兰氏阴性菌比阳性菌对甲醛更为敏感, 细菌芽胞对甲醛的抵抗力是非芽胞细菌的2一15倍。
甲醛在工农业, 医药卫生, 生物制品等多种领域和行业上用途较为广泛, 特别是在生物制品的研制和生产上用来杀菌和灭活病毒自50年代沿用至今。当今在生物制品领域除用以消毒用具、工作间、场所等外, 仍然用它作为杀菌和灭活剂, 例如0.4一0.5%甲醛溶液在37℃下作用7天和28天, 可分别使破伤风和白喉外毒素无毒化对产气荚膜梭状芽胞汗菌A毒素, 经0.01%甲醛溶液处理7天后, 毒性下降80一89%,0.04%甲醛溶液也能灭活大肠杆菌F11株的细胞毒性溶解产物, 从而用于制备中和性抗血清。1%甲醛作用7天后, 能使葡萄球菌C溶血素的溶血性降低以99.9%上, 并使其免疫活性高于天然C溶血素。0.8%甲醛溶液在4℃下作用3天, 可使脊髓灰质炎病毒II型株全部灭活, 如将温度提高到38℃时, 仅用甲醛即可达到同样效果。兽医生物制品中采用甲醛不同浓度和方法制成的菌疫苗也较多, 例如对气肿疽菌培养液采用0.5%于37一38℃杀菌72一96小时, 制成的牛、羊用气肿疽菌苗,对肉毒梭菌在37℃以0.8%杀菌脱毒10天制成的菌苗防治牛、骆驼、水貂其本病效果显著, 在37一38℃用0.5一0.8%分别对腐败梭菌、C型魏氏梭菌、D型魏氏梭菌杀菌和脱毒3一7天配成羊三联菌苗,0.3%在37℃杀菌24一48小时,可制成预防羊大肠杆菌病苗,0.1%对猪源型多杀性巴氏杆菌杀菌7一12小时制成猪肺疫铝菌苗.0.1一0.2%对牛源多杀性巴氏杆菌杀菌7一18小时配制成牛出败铝菌苗,0.2一0.25%对II型猪丹毒扦菌于37℃条件下杀灭处理18一24小时制成猪丹毒铝菌苗,0.5一0.8%对诺维氏梭菌及腐败梭菌于37℃杀菌脱毒3一4天制成羊黑疫快疫菌苗,0.5一0.8%对C型魏氏梭菌于37℃杀菌、脱毒7一14天制成仔猪红痢铝菌苗。0.3%杀菌16一24小时制成羊链球菌铝菌苗,0.8%对肠炎沙门氏都柏林变种和病牛沙门氏菌于37℃杀菌3天制成牛副伤寒铝菌,0.1%对鸡源A型多杀性巴氏杆菌杀灭7一12小时配成禽霍乱铝菌苗。0.3%24小时杀灭链球菌制或猪链球菌铝菌苗还有羊梭菌病四防菌苗, A型兔魏氏梭菌菌苗以及属家畜细小RNA病毒制成的灭活疫苗等都是利用甲醛杀菌、
减毒、灭活、脱毒制造的。我们结合多年生产实践和点滴经验对它的杀菌和灭活机理简介如下。
甲醛:无色气体, 有特殊刺激气味, 对人的眼鼻有刺激作用。气体比重1.067(空气=1), 液体比重0.815(-20℃)。熔点92℃, 沸点19.5℃, 易溶于水和乙醇。水溶液的浓度最高可达55%, 通常为40%, 市面售的一般为36%, 称为甲醛水, 俗称福尔马林, 是有刺激气味的无色液体。
甲醛为活泼的烷化剂, 可作用于氨基、羧基、羟基和巯基, 分别产生经甲基胺, 亚甲基二醇单酯,经甲基酚和硫代亚甲基二醇。由此, 甲醛经与上述功能基团反应, 以羟甲基替代敏感氢原子, 破坏生命基本结构, 导致细菌死亡和病毒灭活。甲醛能与细菌蛋自质的胺基结合, 使蛋白质变性,甲醛与蛋白质结合的结果、形成具有新的性质的化合物。甲醛对核酸的烷化作用比对蛋白质更利于杀灭微生物。
综上所述, 甲醛无论是气体熏蒸还是溶液浸泡对细菌和病毒均有较强的杀灭效能, 对毒素亦有良好的灭活作用。但各型微生物对甲醛的抵抗力差异较大, 故实际应用甲醛消毒时, 对不同类型的污染微生物, 应选择相应合适的处理剂量, 使其达到预期效果。此外, 甲醛作为烷化剂, 与微生物的核酸和蛋白质相结合, 导致其基本结构的改变和破坏,是甲醛杀菌的主要作用机理, 但具体作用环节与详实过程尚未完全明了, 有待进一步深入探讨。 二、甲醛液沉淀后的简易解聚法
我们在多年的科研和生产实践中, 经常遇到从市面购进的甲醛, 如西安化学试剂厂生产的“ 特定分析纯” 产品(含量不少于36%)和成都化学试剂厂生产的“分析纯” 产品(含量不少于36%)等使用前常常发现瓶底出现沉淀物, 经振摇后仍不溶解,究其原因系甲醛聚合产生一种乳白色沉淀物, 从而使含量降低而影响溶液的配制和使用。经试验, 在使用含有乳白色沉淀物的甲醛时, 可用温箱加温或用热水浸泡方法促使沉淀物解聚。方法是①利用65一70℃温箱, 将已有沉淀的瓶装(500ml)甲醛放入, 一般约经25天左右即可解聚。如能在放置过程中逐瓶振摇数次时还可缩短解聚时间。②用前,可将有沉淀的甲醛放入耐高温的容器, 向容器内注水, 使水面超过装甲醛玻瓶的2/3高度为宜, 然后给水中通入蒸汽或用其他加热方法, 使其水温上升到85℃左右(兰州地区), 一般需经48小时即可解聚。如在热水浴过程中能逐瓶振摇数次, 也可促进解聚。经加温解聚的甲醛溶液, 甲醛含量测定可回升到原
来的浓度, PH值无改变, 仍略呈酸性, 对其消毒、杀菌、灭活等作用均无不良影响, 并能收到预期效果。
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