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金刚藤组织培养与快速繁殖

黔南民族师范学院

中国贵州都匀

邮编：558500

2011级生物（2）班 崔猛 指导教师：黎娇玲

摘要：以金刚藤幼嫩茎段为原料进行组织培养便快速繁殖，采用组织培养可以快速获得大量金刚藤无菌苗，使其达到快速繁殖的目的。 关键词;组织培养、快速繁殖、金刚藤

金刚藤 (《西藏常用中草药》)，又名菝葜、铁菱角、马加勒、肋骨柱子、红灯果，冷饭头，铁刺苓，金刚根。为百合科植物西南菝葜的根茎。在我国南方广为分布，其根、茎、叶均可入药,具有消肿解毒祛风利湿、抗炎镇痛、抗肿瘤、治风湿腰腿痛，铁打损伤，瘰疬。等作用。金刚藤的果色红艳,嫩芽鲜红(可食用),树形优美,叶形奇特,甸甸性好,耐寒性强等,可用于攀附岩石、假山,也可作地面覆盖,是一种良好的观赏植物,可以作为南方地区立体绿化树种。金刚藤多为野生,由于花小,单性异株,难以采收到种子,且分株繁殖的繁殖系数低,材料供应不足。由于国内仅对同属的托柄金刚藤有过报道,而本文中的金刚藤本人经过大量查阅文献,其组织培养与快速繁殖尚未发现，本文结果对其进一步综合开发利用可能有一定的参考价值。 1、 实验材料与实验器材 1、1实验材料

金刚藤幼嫩茎段、培养基


1、2实验器材

灭菌锅、蔗糖、酒精、琼脂、纱布等 2、实验步骤 2、1、培养条件

以MS为基本培养基（植物生理学通讯第43卷第3期,2007年6月），诱导培养基:(l)MS+6一BA1.0mg·L一’(单位下同)+NAA0.05;增殖培养基:(2)MS+6一BA1.0+NAA0.2;(3)MS+6一BA2.0+NAA0.1;壮苗培养基:(4)MS;生根培养:(5)1/2MS+NAA1.0。以上培养基中均加入0.8%琼脂,除(5)中加入1.5%蔗糖以外其他培养基加入3%的蔗糖,pH5.8至6.0,高温灭菌。培养温度24一26℃,光强为30至40mol·um-2·s-1’,光照时间为12h.d-1’。 2、2、生长与分化情况 2、2、1、无菌材料的获得

在晴天剪取植株上生长旺盛的嫩枝(嫩枝叶为红色),除去三分之一的叶片。先用洗衣粉水浸泡3到4min,接着用软毛刷轻轻刷洗,再用自来水冲洗2h。然后,在超净工作台上,将枝条放入70%的酒精中浸泡巧15s,用无菌水冲洗5次,再放入0.1%的升汞中消毒4min,无菌水冲洗5次。在培养皿上用纱布吸干材料表面的水分,将其剪成1cm左右、带一个腋芽的节段,接种到培养基(1)中。大约8d后,茎段腋芽处开始萌动;再过10至15d,腋芽长出,1.5至2.0cm高。 2、2、2、芽的分化与增殖

当培养基(1)中长出的腋芽长到2cm左右时,剪下后接种到培养基(2)


和(3)中。10d后2种培养基中均有部分茎段的腋芽处开始抽出新芽。15d后,在培养基(2)中平均形成芽2至3个,芽比较细长,部分展叶;而在培养基(3)上形成的芽平均达到5至6个,芽饱满,健壮。鉴于上述情况,可以将分化出的丛芽切割,接种在培养基(3)上进行增殖培养,30d左右继代1次,增殖系数为4倍左右。继代培养所获得的部分芽较细弱,将其切割成3至5个芽一簇,接种到培养基(3)上进行壮苗培养,20d后芽苗长到2cm高,幼叶展开。 2、2、3、生根与移栽

剪取2cm以上、生长健壮的小苗接种到培养基(4)上进行生根诱导。8d时芽苗切口处稍膨大,有突起。13d时有白色的根分化出来,25d后幼苗基部平均有3一4条白色的根。待幼苗的根平均伸长至3.5cm左右时,出瓶移栽。先在培养室中掀开封口膜3至5d,然后取出小苗,洗去根部培养基,移栽到珍珠岩和蛙石(1:l)混合的基质中,置于半阴通风处,注意保温且保持基质湿润,观察其栽培存活率。 参考文献:

1. 李青,石大兴,王米力,谢翠苹等, 四川稚安.四川农业大学林学园艺学院.植物生理学通讯(2007年6月, 第3期, 第43卷)。

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